Активность трипсиноподобных протеиназ и деградация коллагена слизистой оболочки кишечника при заболеваниях желудочно-кишечного тракта
Аннотация
Цель исследования. Определить активность трипсино-, коллагеназо-, эластазоподобных протеиназ, α1-протеиназного ингибитора, α2-макроглобулина и содержание гидроксипролина в слизистой оболочке кишки и в плазме крови больных с заболеваниями кишечника.
Материал и методы. Обследовано 60 пациентов с язвенным колитом, 42 – с болезнью Крона, 18 – с синдромом раздраженного кишечника и 30 практически здоровых лиц. Супернатант, полученный из биоптатов слизистой оболочки кишечника, использовали для определения биохимических показателей. Активность трипсиноподобных протеиназ оценивали по гидролизу синтетического субстрата N-бензоил-L-аргинин-этилового эфира (БАЭЭ). Активность α1-протеиназного ингибитора (α1-ПИ) и α2-макроглобулина (α2-МГ) определяли унифицированным методом по торможению гидролиза БАЭЭ. Деградацию фибриллярных белков соединительной ткани оценивали по активности эластазо и коллагеназоподобных протеиназ и содержанию фракций гидроксипролина. Активность эластазо и коллагеназоподобных протеиназ определяли, используя в качестве субстрата соответственно N-бутил-оксикарбонил-Lаланин-пара-нитрофениловый эфир (БАНЭ).
Результаты. Выявлена активация протеолиза в слизистой оболочке кишечника и плазме крови больных на фоне снижения активности ингибиторов протеиназ и повышения содержания гидроксипролина. Изменения наиболее выражены при болезни Крона по сравнению с язвенным колитом и синдромом раздраженного кишечника. При язвенном колите с нарастанием степени его тяжести повышаются активность трипсино, эластазоподобных протеиназ и уровень свободного гидроксипролина слизистой оболочки кишечника. Методом логистической регрессии рассчитано, что дефицит α2-МГ в 3,85 раза увеличивает риск развития болезни Крона.
Заключение. При язвенном колите и болезни Крона в слизистой оболочке кишечника наблюдается активация трипсино, эластазо и коллагеназоподобных протеиназ на фоне снижения активности α1-ПИ и α2-МГ, что приводит к деградации соединительнотканных белков. Наиболее выраженное нарушение метаболизма коллагена и эластина, выражающееся в значительном увеличении продуктов распада коллагена, активности протеиназ на фоне дефицита ингибиторов в слизистой оболочке кишечника и плазме крови происходит при болезни Крона.
Материал и методы. Обследовано 60 пациентов с язвенным колитом, 42 – с болезнью Крона, 18 – с синдромом раздраженного кишечника и 30 практически здоровых лиц. Супернатант, полученный из биоптатов слизистой оболочки кишечника, использовали для определения биохимических показателей. Активность трипсиноподобных протеиназ оценивали по гидролизу синтетического субстрата N-бензоил-L-аргинин-этилового эфира (БАЭЭ). Активность α1-протеиназного ингибитора (α1-ПИ) и α2-макроглобулина (α2-МГ) определяли унифицированным методом по торможению гидролиза БАЭЭ. Деградацию фибриллярных белков соединительной ткани оценивали по активности эластазо и коллагеназоподобных протеиназ и содержанию фракций гидроксипролина. Активность эластазо и коллагеназоподобных протеиназ определяли, используя в качестве субстрата соответственно N-бутил-оксикарбонил-Lаланин-пара-нитрофениловый эфир (БАНЭ).
Результаты. Выявлена активация протеолиза в слизистой оболочке кишечника и плазме крови больных на фоне снижения активности ингибиторов протеиназ и повышения содержания гидроксипролина. Изменения наиболее выражены при болезни Крона по сравнению с язвенным колитом и синдромом раздраженного кишечника. При язвенном колите с нарастанием степени его тяжести повышаются активность трипсино, эластазоподобных протеиназ и уровень свободного гидроксипролина слизистой оболочки кишечника. Методом логистической регрессии рассчитано, что дефицит α2-МГ в 3,85 раза увеличивает риск развития болезни Крона.
Заключение. При язвенном колите и болезни Крона в слизистой оболочке кишечника наблюдается активация трипсино, эластазо и коллагеназоподобных протеиназ на фоне снижения активности α1-ПИ и α2-МГ, что приводит к деградации соединительнотканных белков. Наиболее выраженное нарушение метаболизма коллагена и эластина, выражающееся в значительном увеличении продуктов распада коллагена, активности протеиназ на фоне дефицита ингибиторов в слизистой оболочке кишечника и плазме крови происходит при болезни Крона.
Об авторах
О. Е. АкбашеваРоссия
В. А. Бурковская
Россия
А. Е. Деханд
Россия
Э. И. Белобородова
Россия
Л. А. Акимова
Россия
Е. Л. Наумова
Россия
Е. А. Квач
Россия
Список литературы
1. Бычкова В.И., Смирнова Б.И., Лесничук Л.В. Биохимические показатели соединительной ткани в диагностике начальной стадии цирроза печени // Клин. лаб. диагностика. – 2003. – № 1. – С. 10–14.
2. Веремеенко К.Н. Протеолитические ферменты и их ингибиторы. Новые области применения в клинике // Врач. дело. – 1994. – № 1. – С. 8–13.
3. Загромова Т.А., Акбашева О.Е., Ермаков С.Ю. Активность ингибиторов протеиназ плазмы крови при язвенной болезни в зависимости от морфофенотипа конституции больных // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 2007. – Т. 17, № 4. – С. 30–35.
4. Златкина А.Р. Синдром раздраженного кишечника // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 2000. – Т. 10, № 1. – С. 13–17.
5. Зорин Н.А., Зорина В.Н., Зорина Р.М., Левчен-ко В.Г. Универсальный регулятор – a2-макроглобулин // Клин. лаб. диагностика. – 2004. – № 11. – С. 18–21.
6. Исламова Е.А. Оценка эффективности терапии синдрома раздраженного кишечника и НЯК по маркерам метаболизма соединительной ткани и серотонинсекретирующих клеток толстой кишки: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. – Саратов, 2004. – 22 с.
7. Корепанов А.М., Шкляев А.Е., Шараев П.Н. Особенности метаболизма коллагена при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки // Клин. лаб. диагностика. – 2005. – № 5. – С. 14–16.
8. Кузнецова К.П., Прошина Л.Я., Приваленко М.Н. Модификация содержания оксипролина в сыворотке крови // Лаб. дело. – 1998. – № 8. – С. 8–10.
9. Нартикова В.Ф., Пасхина Т.С. Унифицированный метод определения активности a1-антитрипсина и a2-макроглобулина в сыворотке (плазме) крови человека // Вопросы мед. химии. – 1979. – Т. 25, № 4. – С. 494–499.
10. Оглоблина О.Г., Платонова Л.В., Пасхина Т.С. Измерение активности трипсино- и эластазоподобных протеиназ полиморфноядерных лейкоцитов и уровня их кислотостабильных ингибиторов в бронхиальном секрете человека. – М.: МГУ, 1984. – 14 с.
11. Пехтерева-Донченко Е.В. Состояние кининогенеза у детей при язвенной болезни и хроническом гастродуодените: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. – Томск, 2000. – 15 с.
12. Пузырев В.П., Савюк В.Я. Клинико-генетические аспекты недостаточности a1-антитрипсина // Мед. генетика. – 2002. – № 5. – С. 202–209.
13. Халиф И.Л., Лоранская И.Д. Воспалительные заболевания кишечника: неспецифический язвенный колит и болезнь Крона (Клиника, диагностика и лечение). – М., 2004. – 200 с.
14. Шараев П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови // Лаб. дело. – 1981. – № 5. – С. 283–285.
15. Шараев П.Н., Пишков В.Н., Заворыгина Н.Г. Определение коллагенолитической активности плазмы крови // Лаб. дело. – 1987. – № 1. – С. 60–62.
16. Akutsu H., Iwama H. Concentrative relationship between polymorphonuclear elastase and urinary trypsin inhibitor in amniotic fluid // Arch. Gunecol. Obstet. – 2000. – Vol. 263, N 4. – P. 156–159.
17. Audrain M.A., Sesboue R., Baranger T.A. et al. Analysis of anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA): frequency and specificity in a sample of 191 homozygous (PiZZ) alpha1-antitrypsin-deficient subjects // Nephrol. Dial. Transplant. – 2001. – Vol. 16, N 1. – Р. 39–44.
18. Biancone L., Onali S., Calabrese E. et al. Non-invasive techniques for assessing postoperative recurrence in Crohn’s disease // Dig. Liver Dis. – 2008. – Vol. 40 (suppl 2). – Р. 265–270.
19. Buresi M.C., Buret A.G., Hollenberg M.D. et al. Activation of proteinase-activated receptor 1 stimulates epithelial chloride secretion through a unique MAP kinase- and cyclo-oxygenase-dependent pathway // FASEB J . – 2002. – N 16. – Р. 1515–1525.
20. Buresi M.C., Schleihauf E., Vergnolle N. et al. Protease-activated receptor-1 stimulates Ca2+-dependent Cl– secretion in human intestinal epithelial cells // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol . – 2001. – Vol. 281. – P. 323–332.
21. Bustos D., Negri G., De Paula J.A. et al. Colonic proteinases: increased activity in patients with ulcerative colitis // Medicina. – 1998. – Vol. 58. – P. 262–264.
22. DeFea K.A., Zalevsky J., Thoma M.S. et al. Beta-arrestin-dependent endocytosis of proteinase-activated receptor 2 is required for intracellular targeting of activated ERK1/2 // J. Cell Biol. – 2000. – Vol. 148. – P. 1267–1281.
23. Harada N., Okajima K., Liu W. et. al. Activated neutrophils impair gastric cytopritection role of neutrophil elastase // Dig. Dis. Sci. – 2000. – Vol. 45, N 6. – P. 1210–1216.
24. Kanke T., Macfarlane S.R., Seatter M.J. et al. Proteinase-activated receptor-2-mediated activation of stress-activated protein kinases and inhibitory kappa B kinases in NCTC 2544 keratinocytes // J. Biol. Chem. – 2001. – N 18. – Р. 18.
25. Kawabata A., Kinoshita M., Nishikawa H. et al. The protease-activated receptor-2 agonist induces gastric mucus secretion and mucosal cytoprotection // J. Clin. Invest. – 2001. – Vol. 107. – P. 1443–1450.
26. Kawao N., Sakaguchi Y., Tagome A. et al. Protease-activated receptor-2 (PAR-2) in the rat gastric mucosa: immunolocalization and facilitation of pepsin/pepsinogen secretion // Br. J. Pharmacol. – 2002. – Vol. 135. – P. 1292–1296.
27. Kotlowski R., Bernstein C.N., Silverberg M.S. et al. Population-based case-control study of alpha 1-antitrypsin and SLC11A1 in Crohn’s disease and ulcerative colitis // Inflamm. Bowel. Dis. – 2008. – Vol. 14, N 8. – Р. 1112–1117.
28. Ossovskaya V.S., Bunnett N.W. Protease-activated receptors: Contribution to physiology and disease // Physiol. Rev. – 2004. – Vol. 84. – Р. 579–621.
29. Raithel M., Winterkamp S., Pacurar A. et al. Release of mast cell tryptase from human colorectal mucosa in inflammatory bowel disease // Scand. J. Gastroenterol. – 2001. – N 36. – Р. 174–179.
30. Yang P.C., Berin M.C., Yu L., Perdue M.H. Mucosal pathophysiology and inflammatory changes in the late phase of the intestinal allergic reaction in the rat // Am. J. Pathol. – 2001. – Vol. 158. – Р. 681–690.
Рецензия
Для цитирования:
Акбашева О.Е., Бурковская В.А., Деханд А.Е., Белобородова Э.И., Акимова Л.А., Наумова Е.Л., Квач Е.А. Активность трипсиноподобных протеиназ и деградация коллагена слизистой оболочки кишечника при заболеваниях желудочно-кишечного тракта. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2010;20(2):31-38.
For citation:
Akbasheva О.E., Burkovskaya V.A., Dehand A.E., Beloborodova E.I., Akimova L.A., Naumova E.L., Kvach E.A. Activity trypsin-like proteinases and intestinal mucosa collagen degradation at gastro-intestinal diseases. Russian Journal of Gastroenterology, Hepatology, Coloproctology. 2010;20(2):31-38. (In Russ.)
Просмотров:
34
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 License.
Послать статью по эл. почте 
